潘桂群++孙东升
[摘要] 意图 研讨瑞舒伐他汀对肥壮大鼠心肌核转录因子-κB（NF-κB）蛋白表达的影响，为深入讨论瑞舒伐他汀对心肌的维护机制供给根据。 办法 将30只雄性大鼠随机分红3组：正常组、肥壮组和瑞舒伐他汀干涉组，别离用一般饲料、高脂饲料以及高脂饲料+瑞舒伐他汀养殖12周，别离测定各组的心脏分量、TC、TG、HDL、LDL-C、NF-κB蛋白表达和HE染色调查心肌病理安排学改动。 成果 肥壮大鼠的血清TG、TC、LDL-C、心脏分量的水均匀显着高于正常组（P<0.01）；瑞舒伐他汀干涉可削减心肌NF-κB蛋白表达（P<0.05），显着下降肥壮大鼠的血脂及改进心肌的病理安排学改动。 定论 瑞舒伐他汀在调理血脂代谢的一起可能经过NF-κB蛋白信号通路减轻了肥壮大鼠心肌安排的病理改动。
[关键词] 瑞舒伐他汀；肥壮大鼠；核因子-κB；心肌
[中图分类号] R364.2+2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）01-0004-03
Effects of rosuvastatin on NF-κB expression in obese rats myocardium
PAN Guiqun1 SUN Dongsheng2
1.Department of Internal Medicine， the Third People's Hospital of Yuyao City in Zhejiang Province， Yuyao 315400， China； 2.Cadre Department， Zhejiang Provincial Peoples Hospital， Hangzhou 310014， China
[Abstract] Objective To evaluate the effects of rosuvastatin on nuclear transcription factor-kB （NF-kB） protein expression in obese rat cardiac and to explore the roles of the protection of rosuvastatin about the heart. Methods Thirty male rats were divided into three groups： normal group， high -fat group and hight-fat+Rosuvastatin group. They were obtained a standard diet， high-fat diet and a high-fat+rosuvastatin diet respectively，for 12 weeks. The levels of heart weight， TC， TG， HDL， LDL-C， NF-kB protein expression， and HE staining histopathological changes of the myocardial. Results The levels of serum TG、TC、LDL-C and heart weight in obese rats were all higher than control rats（P<0.01）； Rosuvastatin could effectivly reduce the levels of NF-kB （P<0.05），blood lipid and induced the pathological changes in myocardial. Conclusion It demonstrates that Rosuvastatin could effectively reduce the levels of blood lipid and may with NF-kB protein pathway reduced the pathologic changes in myocardial tissue of obese rats .
[Key words] Rosuvastatin； Obesity rats； Nuclear factor-kB； Myocardial
肥壮常与高血压、动脉硬化、脂质代谢紊乱等一起呈现，是心血管疾病的风险要素。其间核因子-κB（NF-κB）是一种具有多项调控效果的转录因子，激活后可调控多种炎性因子、细胞因子的表达，参加了多种心血管疾病的演化，而引起心肌的炎性反响[1]。瑞舒伐他汀是HMG-CoA还原酶按捺剂，经过添加细胞外表的肝LDL受体数量，增强对LDL的吸取和分解代谢，来按捺肝脏VLDL组成，然后削减VLDL和LDL颗粒的总量，下降总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇。一起还具有扩张血管、添加冠状动脉血流量等效果。本文对瑞舒伐他汀在调理血脂的根底上是否进一步按捺了NF-κB的激活来减轻心肌炎性损害展开进一步研讨。
1 材料与办法
1.1 材料
1.1.1 动物来历 由浙江中医药大学动物中心供给。挑选雄性Wister大鼠30只，每只大鼠体重在（150±10）g，分3组，每组大鼠均单笼养殖，实验前适应性喂食1周，动物室温度（22±5）℃，相对湿度（45±10）%，光照12 h，每周记载1次。
1.1.2 药物 瑞舒伐他汀，批号：H20110562，标准：每片10 mg，产地：阿斯利康制药有限公司。
1.2 养殖办法
随机抽取10只，予以根底饲料，为正常组。余20只予以高脂饲料，为肥壮组，其间在肥壮组中另取10只作为实验组；实验组在给高脂饲料的一起予以瑞舒伐他汀干涉。
饲料由浙江省医学科学院供给。高脂饲料配方（70.75%一般饲料加上10%蛋黄粉、10%白砂糖、8%猪油、1%胆固醇及0.25%胆酸）。其间，药物干涉组予瑞舒伐他汀用生理盐水溶解，10 mg/kg，灌胃，共喂食12周。
1.3 检测办法
别离在干涉前及干涉后的第12周，用电子秤称大鼠体重，血清NF-κB测定选用放射免疫法；血清TG、TC、HDL-C、LDL-C测定，均选用酶法。
1.4统计学处理
使用SPSS16.0统计学软件进行剖析，计量材料均以（x±s）标明，多组间比较选用方差剖析，两组间比较选用t查验，P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
2.1 肥壮大鼠心脏分量的改动
高脂饮食12周后，正常组、肥壮组和实验组大鼠的心脏分量别离为（0.864±0.024）g/m2、（0.915±0.031）g/m2、（0.880±0.016）g/m2，肥壮组与正常组比较差异有统计学含义（P<0.05）。正常组、肥壮组和实验组心脏分量增量别离为（0.215±0.019）g/m2、（0.301±0.022）g/m2、（0.221±0.017）g/m2，肥壮组与实验组比较差异有统计学含义（P<0.01）。
2.2血脂、NF-κB 改动
喂食12周后，3组大鼠的血脂、NF-κB均有改动，肥壮组大鼠血清TC、TG均较正常饮食组高，而HDL-C较正常组低，差异有统计学含义（P<0.01）；高脂饮食+瑞舒伐他汀干涉组与肥壮组比较，TG、TC、LDL-C均显着下降，差异有统计学含义（P<0.01）；肥壮组大鼠心肌NF-κB蛋白排泄添加，在瑞舒伐他汀干涉下下降水平有统计学差异（P<0.05）。见表1。
2.3 各组大鼠心肌形态学改动
各组大鼠在喂食12周后心肌形态学改动，见图1。肥壮大鼠心肌与正常大鼠心肌He染色心态学比较可见肥壮大鼠心肌细胞肥壮，胶原增生，可见纤维紊乱，线粒体显着肿胀，有钙化；瑞舒伐他汀干涉医治组与肥壮大鼠心肌心态学比较可见干涉组大鼠心肌纤维呈短柱状摆放，含有糖原颗粒，线粒体肿胀不显着，嵴空隙无显着改动，挨近正常。
2.4 肥壮大鼠血脂及NF-κB之间的相关性剖析
血清NF-κB和TC、LDL-C显着正相关，相联系数别离为0.449和0.325，阐明肥壮时可能经过NF-κB的表达排泄添加，瑞舒伐他汀干涉医治后下降水平有统计学差异（P<0.01）。
3 评论
肥壮经常伴有血糖、血脂反常、睡觉呼吸困顿征等并发症，而这些改动均可影响心脏。许多肥壮与心血管疾病的研讨标明，肥壮是导致脂质堆积心脏的成果[2]，肥壮时心肌肥厚、心脏增大[3]，但发作机制尚不清楚。现在部分的炎症反响在肥壮中所起的效果越来越引起人们的注重。肥壮时可经过多种途径激活炎症反响，是导致动脉粥样硬化及冠心病病变的重要原因，肥壮时蛋白质的非酶氧化、自由基的开释，炎症的影响均可对心肌代谢发作影响。本实验经过对大鼠的饮食喂食与瑞舒伐他汀的干涉，来讨论其对血脂代谢调理的一起按捺NF-κB的激活以减轻心肌炎性损害，然后对心脏起到必定的维护效果。
NF-κB是从B淋巴细胞核抽提物中检测到的一种能与免疫球蛋白κ轻链基因增强子κB序列特异结合的核蛋白因子，是一类普遍存在的转录因子，广泛存在于全身安排细胞中，对错特异性炎症反响的灵敏目标。它是Rel宗族的成员，在静息状况下不具有转录活性，但常在炎症部位活动显着，提示NF-κB在炎症反响中起重要效果[4，5]。NF-κB在机体中参加多种炎症因子功用的调理，特别是在肥壮、动脉硬化的发作及开展中起着重要的效果，几乎在动脉硬化的整个进程起着重要效果， 尤其是在心肌细胞中的表达上。当NF-κB存在于心肌细胞胞浆中，以无活性状况存在，当细胞遭到外界影响时，NF-κB暴露出NLS，随之进入核内，与靶基因发动因子上的κB结合，诱导或调理因子的表达而使其发挥效果。有研讨标明[6，7]血脂代谢反常导致活性氧及氧自由基的开释及脂质的过氧化，被认为是激活NF-κB的重要因子而使细胞增殖。
肥壮能够使某些脂肪因子的发作添加促进炎症细胞，特别是巨噬细胞的增多，一起开释安排溶解酶，加快炎症因子的反响。肥壮对大鼠的心肌损害显着，如呈现氧化应激、一氧化氮及内毒素等表达，这些均能够一起引起NF-κB的被激活。NF-κB激活后能够调控许多炎症因子介质的开释，如白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α等，这些炎症介质基因可直接效果于血管内皮细胞及心肌细胞一起构成损害，而这些炎症因子又进一步激活NF-κB，再次影响心肌的损害，构成恶性循环[8]。肥壮时脂质堆积可能经过激活心肌NF-κB表达添加，炎症因子开释增多，导致心肌细胞受损，心肌胶原纤维过度增生，心肌硬化，使心脏顺应性下降[9，10]。以往对心脏的研讨常会集在心肌肥厚的自身，心室的重塑首要体现在心肌细胞的肥厚及增生。但近年来的研讨发现[11]，心肌细胞炎症因子的影响呈现导致心肌胶原脂质的反常堆积，在心肌重构中也起着必定的效果。NF-κB作为炎症影响因子对心肌安排引起纤维化及基质改动而导致心室重构。在本实验成果中显现高脂饮食后，心肌细胞肥壮增生，纤维摆放紊乱，在瑞舒伐他汀干涉后实验肥壮大鼠的心脏分量、血脂及NF-κB水均匀减低，肥壮大鼠的心肌细胞形态学在瑞舒伐他汀的干涉下也较前有显着改动，挨近正常心肌细胞形态学。实验成果显现在肥壮大鼠加用瑞舒伐他汀后可调整血脂并使心肌NF-κB水平下降，即在肥壮大鼠中，瑞舒伐他汀经过按捺心肌安排NF-κB蛋白信号通路，来下降心肌安排中的炎症反响，然后起到减缓心肌肥厚的进一步开展。瑞舒伐他汀的抗炎机制可能是经过按捺NF-κB对心血管内皮细胞的增殖、滋润，下降NF-κB的活性，削减炎症介质的生成。瑞舒伐他汀能够对肥壮大鼠部分心肌起到反转效果[12]，对肥壮大鼠的心脏有维护效果。
血脂代谢的反常是加快动脉血管及心肌病变的开展之一，在肥壮者中脂质及炎症的一起效果加剧了心肌损害。瑞舒伐他汀是一种强效的新式他汀，具有杰出的临床使用远景。有研讨标明[13]，他汀具有多效性，不只能够调理血脂、安稳斑块，调理免疫、抗肿瘤，并且具有抗炎、改进内皮细胞功用、按捺滑润肌细胞增殖、削减炎症介质开释等广泛效果，经过下降脂质代谢来削减心肌血管细胞的肥壮，可有用按捺心肌肥厚发作和肥厚心脏向心衰的改动[14-16]。本例实验成果显现，肥壮组大鼠的NF-κB蛋白表达均高于正常组及瑞舒伐他汀干涉组，并且瑞舒伐他汀干涉组水平与正常组类似。一起，实验还检测了各组大鼠的心脏分量，成果也显现瑞舒伐他汀干涉组较肥壮组有显着下降。瑞舒伐他汀可经过调理血脂而削减心肌脂质的堆积，阐明瑞舒伐他汀具有改进肥壮大鼠的心肌效果，且该药理效果机制与其按捺心肌安排中的NF-κB蛋白相关信号分子的传导有关。研讨发现[17]瑞舒伐他汀能够发挥抗氧化的效果，首要是使导致参加心肌血管硬化的脂蛋白含量削减，进步PPARa和PPARbrta 的蛋白水平，PPARa可按捺心肌NF-κB的生成及开释，对NF-κB的按捺可阻挠其他炎症因子的激活，然后改进炎症引起的心肌肥厚；瑞舒伐他汀还可经过按捺RHOA信号传递通路使心肌内皮细胞和一氧化氮组成酶的功用添加，促进心肌内皮细胞一氧化氮的组成，使一氧化氮的水平升高，保持心肌内皮细胞的安稳性，改进心室重构。别的还发现瑞舒伐他汀能有用按捺肥壮大鼠心肌NF-κB的激活，有缓解肥壮大鼠心肌肥厚，减轻心肌炎症损害而引起的心脏重构，可显着削减心力衰竭的发作。阐明瑞舒伐他汀不只具有调整血脂的效果，还有对心血管炎症、免疫调理方面的效果，可能是一条新的医治途径。本实验进一步提示瑞舒伐他汀在调脂的根底上还有抗炎抗氧化及反转效果，可按捺心肌肥厚的发作、开展，改进心肌纤维的结构功用，对心肌安排有维护效果，并能改进心功用[18]。
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（收稿日期：2014-08-18）
