张妍琴+唐银江
[摘要] 意图 了解肿瘤患者别离铜绿假单胞菌（PAE）的散布及耐药状况，为临床合理运用抗菌药物防备和操控感染供给根据。 办法 搜集我院肿瘤专科2013年1月1日～2014年12月31日各类临床标本PAE别离株285株，检测PAE对常用的11种抗菌药物的灵敏性，运用双纸片协同实验检测产金属β内酰胺酶状况。 成果 285株PAE别离自血液17.89%（51/285），痰、支气管灌洗液36.14%（103/285），尿液5.97%（17/285），胸腹水、脑脊液20.00%（57/285），脓液、分泌物20.00%（57/285）。PAE对亚胺培南、氨曲南、哌拉西林的耐药率较高，依次为30.18%、21.75%、19.65%；对头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、庆大霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、妥布霉素、阿米卡星灵敏率均>70%。 定论 PAE对亚胺培南、氨曲南耐药较高，而对氨基糖苷类、喹诺酮类、头孢吡肟、头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦的灵敏率较高，可作为优先选择药物。
[关键词] 铜绿假单胞菌；肿瘤患者；耐药性；灵敏性；金属β内酰胺酶
[中图分类号] R446.5 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）26-0116-03
Analysis of distribution and drug resistance of pseudomonas aeruginosa in tumor hospital
ZHANG Yanqin TANG Yinjiang
Department of Clinical Laboratory， Shaoyang Hospital of Traditional Chinese Medicine in Hu'nan Province， Shaoyang 422000， China
[Abstract] Objective To investigate the distribution and drug resistance of the pseudomonas aeruginosa （PAE） isolated from tumor patients and provide reference for the clinical rational use of antibacterial agents to prevent and control infection. Methods A total of 285 strains of PAE isolated from various clinical specimens of our hospital from January 1， 2013 to December 31， 2014 were collected. The sensitivity of PAE to 11 types of antibacterial agents was detected and the double-disk synergy test was used to detect the situation of metallo-β-lactamase. Results Of the 285 strains of PAE， 17.89%（51/285） was isolated from blood， 36.14%（103/285） from sputum and bronchial lavage fluid， 5.97%（17/285） from urine， 20.00%（57/285） from pleural effusion and cerebrospinal fluid， and 20.00%（57/285） from pus and serection. The drug resistance rates of PAE to imipenem， aztreonam and piperacillin were high， which were 30.18%， 21.75% and 19.65% respectively. The sensitive rates of PAE to ceftazidime， piperacillin/tazobactam， cefepime， gentamicin vancomycin， ciprofloxacin， levofloxacin， tobramycin and amikacin were all larger than 70%. Conclusion The drug resistance rates of PAE to imipenem and aztreonam are high while the sensitive rates of PAE to aminoglycosides， quinolones， cefepime， ceftazidime and piperacillin/tazobactam are high， which can serve as the preferred drugs.
[Key words] Pseudomonas aeruginosa； Tumor patients； Drug resistance； Sensitivity； Metal β-lactamase
铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa，PAE）是医院感染的常见条件致病菌之一，可引起下呼吸道感染、中枢神经体系感染、血流感染等。近年来，PAE对许多抗菌药物的耐药率越来越高，多重耐药株与泛耐药株不断呈现，不同区域和不同医院状况各异。为辅导临床合理运用抗菌药物医治，现将我院肿瘤专科2013年1月1日～2014年12月31日别离的285株PAE的散布与耐药状况剖析报导如下。
1 材料与办法
1.1 材料来历
搜集临床常见标本（痰液、支气管灌洗液、脓液、创伤分泌物、胸腹水、脑脊液、血、尿）别离PAE 285株。菌株置于低温冰箱保存。质控菌株为PAE ATCC27853，大肠埃希菌ATCC35218、ATCC25923。
1.2 仪器和试剂
11种药敏纸片为Oxoid公司产品，2-琉基丙酸购自美国ACROS ORGANICS公司，哥伦比亚血琼脂培育基（BA），MH琼脂培育基均购自广州迪景公司，细菌判定及药敏剖析运用法国生物梅里埃公司Vitek 2 Compact 全自动微生物剖析/药敏仪。
1.3 细菌的别离、培育与判定
按《全国临床查验操作规程》（第2版）操作[1]。成果按美国临床和实验室规范协会（CLSI）2012版规范[2]做出判别。对头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、庆大霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、妥布霉素、阿米卡星耐药成果，用K-B药敏纸片法复查药敏实验成果，避免呈现显着差错。
1.4 金属β内酰胺酶检测
对碳青霉烯类抗生素耐药与中介的菌株进行金属β内酰胺酶检测实验，金属β内酰胺酶检测选用双纸协同实验。具体办法：在MH平板上涂布受试细菌，贴上两张亚胺培南纸片（30 μg/片），两纸片相距4～5 cm，在其中一个亚胺培南纸片的周围贴上一张空白纸片，使两纸片相距2.0～2.5 cm，在空白纸片上滴加浓度为95%的2-琉基丙酸2 μL，经37℃18～24 h孵育，若2-琉基丙酸周围的亚胺培南纸片近亚胺培南纸片一侧呈现抑菌效果增强或两纸片之间呈现协同灵敏区，判定为受试菌产金属β内酰胺酶菌株。
1.5 统计学剖析
一切数据选用世界卫生组织细菌耐药性监测网软件WHONET5.6软件统计剖析。
2 成果
2.1 铜绿假单胞菌散布状况
铜绿假单胞菌首要别离自痰、支气管灌洗液标本，其次是胸腹水、脑脊液与脓液、分泌物标本。见表1。
表1 2013～2014年别离的285株PAE标本散布构成[n（%）]
2.2 药敏实验成果
PAE对亚胺培南、氨曲南、哌拉西林的耐药率较高，依次为30.18%、21.75%、19.65%；对头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、庆大霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、妥布霉素、阿米卡星灵敏率均>70%。见表2。
2.3 金属β内酰胺酶检出率
对128株亚胺培南耐药与中介的菌株运用纸片协同法检测金属β内酰胺酶。用该办法检出阳性菌株32株，阳性率25.00%。
3 评论
从本研讨材料来看，肿瘤医院别离的PAE首要来自痰与支气管灌洗液，占36.14%，阐明PAE是引起肿瘤患者下呼吸道感染的首要病原菌之一。有文献报导下呼吸道医院感染的病原菌中铜绿假单胞菌占第1位[3]；张译心等[4]研讨也显现PAE的院内感染以呼吸道感染为主，且对各种抗菌药物耐药；呼吸体系与无菌体液及创伤分泌物的别离株占76.14%，与文献[5，6]报导也相符；肿瘤患者存在免疫体系功用紊乱现象，很简单并发感染。别的，由于肿瘤患者的医治手法一般为手术、放化疗与介入性医治，感染根本来自医治时呈现的并发症，开胸患者机械通气多，也很简单并发呼吸机相关性肺炎（VAP），而VAP的首要病原菌也是PAE，其次是胸腹水、脑脊液及脓液、分泌物，并发胸腹腔与颅内感染的患者除了抵抗力低、粒细胞缺少，也与患者术后放置引流管不无关系。
近年来，世界各地报导PAE多重耐药株不断添加，特别对β内酰胺类抗菌药物耐药严峻，且不同地域与不一起期、不同医院与人群中PAE的耐药及耐药基因各异。在本研讨中，PAE对亚胺培南、氨曲南、哌拉西林的耐药率较高。特别对亚胺培南耐药率到达30.18%，显着高于归纳医院的报导[7]。这是由于肿瘤患者免疫力低，当存在感染危险时，医师通常会运用较高档与广谱抗菌药物来赶快操控感染有关。氨曲南的耐药率为21.75%，较国内归纳医院报导的低[7]，可能与该类药物本院用量不大有关。对哌拉西林的耐药可能与细菌产β内酰胺酶有关。PAE耐药机制杂乱，有文献报导，其经过发作多种β内酰胺酶、金属酶、头孢菌素酶及外膜孔蛋白缺失等进程，对多种抗菌药物发作耐药性[8]。而对氨基糖苷类药物的灵敏性高，灵敏率均超越85%，而归纳医院氨基糖苷类药物的灵敏率据周碧云等[9]报导阿米卡星为77.3%，庆大霉素为56.2%，妥布霉素为84.4%，这一成果远远低于肿瘤专科医院，其原因可能为归纳医院该类药物的运用率较高，特别是呼吸科的患者，常用来做为雾化吸入医治肺炎，伤科与妇科也常常用来做感染部分冲刷，这些部分用药的添加，加快了细菌耐药株的发作，因而应该削减这种不合理的抗菌药物的部分运用，以延平缓削减细菌耐药的发作。肿瘤专科医院阿米卡星的灵敏率均到达91.14%，庆大霉素与妥布霉素的灵敏率也分别为85.18%和89.09%，如此高的灵敏率，按理可作为PAE感染医治的首选药物，但由于这类药物不良反应较多，关于肿瘤等重症患者选用却受限，这也正是这类药物灵敏率高的原因地点。本研讨中285株PAE对喹诺酮类的药物灵敏率都超越了80%，与张毅斐等[10]的报导挨近。喹诺类关于晚年结构性肺炎兼并PAE感染时，效果杰出，这是由于该类药物在呼吸体系的药物浓度显着高于血药浓度所造成的。可是该类药物的不良反应较多，关于肝肾功用欠好的患者，在用药时要注意监测肝肾功用。近年来，叶露等[11]报导在免疫缺点患者中感染PAE对喹诺酮类药物耐药率较高。这是由于免疫缺点者一起兼并感染其他时机致病菌的机率很高，其他病原体与PAE相互效果，可导致PAE构成一层生物膜，导致喹诺酮类药物难以穿透生物膜对PAE发挥抗菌效果。一部分肿瘤患者就是免疫缺点患者，免疫缺点患者易发作各种时机性感染与肿瘤，这一点应该引起注重。对头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶的灵敏率都达70%以上，可作为优先选择药物，但近年来其耐药率有上升趋势，应当引起注重。
PAE的耐药机制多种多样[12-16]。本材料显现，PAE耐IMP的菌株中金属β内酰胺酶的检出率仅为25.00%，阐明碳青霉烯类抗菌药物的过度运用引起PAE的耐药机制不是产金属β内酰胺酶为主，而是诱导铜绿假单胞菌外膜蛋白及外排体系骤变。金属β内酰胺酶不是PAE耐IMP的首要耐药机制，与相关文献[13]的报导相符。
在世界范围内，非发酵革兰氏阴性杆菌特别是PAE的多重耐药、泛耐药别离株的发作率在上升，临床医治应根据药敏成果以β内酰胺类药为根底的联合用药，以削减和推迟细菌耐药的发作。
[参考文献]
[1] 叶应妩，王毓三. 全国临床查验操作规程[M]. 第2版. 南京：东南大学出版社，1997：437-576.
[2] CLS. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing. Twentieth informational supplement，M100-S20[S]. CLSI，2012.
[3] 李雅琴，周冠华，刘国英，等. 住院患者下呼吸道医院感染原因剖析与防备措施[J]. 中华医院感染学杂志，2011， 21（17）：3597-3599.
[4] 张译心，王艳，宋杰. 153株铜绿假单胞菌感染散布及耐药性剖析[J]. 中华全科医学，2013，11（7）：1113-1114.
[5] 谢强，马筱玲，玉素，等. 铜绿假单胞菌临床散布及耐药性剖析[J]. 中华医院感染学杂志，2013，23（5）：1166-1168.
[6] 白洁云，严汝庆. 2009-2013年贺州市人民医院铜绿假单胞菌的散布及耐药性剖析[J]. 现代药物与临床，2014， 29（2）：192-195.
[7] 张瑞君，隋素琴，鞠春梅，等. 归纳医院铜绿假单胞菌的感染与耐药性[J]. 中华医院感染学杂志，2011，21（17）：3704-3705.
[8] 朱涛，孙各琴，孙运涛，等. 铜绿假单胞菌β内酰胺酶基因的检测与散布[J]. 中华医院感染学杂志，2011，21（17）：3545-3548.
[9] 周碧云，朱旭慧，陈中举，等. 2009-2013年血液标本病原菌耐药性监测[J]. 我国感染与化疗杂志，2015，15（1）：1-5.
[10] 张毅斐，武元赫，张毅，等. 233例感染铜绿假单胞菌的晚年患者耐药性剖析[J]. 有用药物与临床，2014，17（12）：1611-1614.
[11] 叶露，陈劲峰，潘景升，等. 艾滋病与非艾滋病患者铜绿假单胞菌感染临床及耐药比照研讨[J]. 岭南现代临床外科，2014，12（14）：694-697.
[12] Bonomo RA，Szabo D. Mechanisms of multidrug resistance in Acinetobacter species and Pseudomonas aeruginosa[J]. Clin Infect Dis，2006，43（suppl 2）：s49-56.
[13] Breidenstein EB，dela Fuente-Nuezc，Hancock RE. Pseudomonas aeruginosa：All roads lead to resistance[J]. Trends Microbiol，2011，19（8）：419-426.
[14] Wolter DJ，Lister PD. Mechanisms of β-lactam resistance among Pseudomonas aeruginosa[J]. Curr pharm Des，2013， 19（2）：209-222.
[15] 荣仕成. 64株铜绿假单胞菌的临床散布及耐药性剖析[J].中外医学研讨，2015，13（15）：62-63.
[16] 金春梅. 延边大学隶属医院2010～2012年铜绿假单胞菌感染散布及耐药性剖析[J]. 我国现代医师，2013，51（35）：66-67.
（收稿日期：2015-05-04）
